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關(guān)于細胞培養(yǎng)基的一些問題

更新時間:2023-01-12點擊次數(shù):1118

一、為什么你公司液體培養(yǎng)基1640顏色發(fā)黃,是pH值不對嗎?
不是。因為配方原因,1640為堿酚紅型,其中酚紅的濃度只有DMEM的四分之一,所以是因為酚紅濃度低,而非PH值低。

二、液體培養(yǎng)基可以放-20℃保存嗎?

不可以!因為在-20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有的鹽可能無法重新溶解,從而導致培養(yǎng)基滲透壓降低,培養(yǎng)細胞時,細胞容易破裂而死亡。
三、為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值越來越偏堿性?

培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時, 可以通入無菌過濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。

四、如何選用培養(yǎng)基? 選擇培養(yǎng)基沒有一定標準,有幾點建議可供參考:

1. 建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞shouxuan的培養(yǎng)基??梢圆殚單墨I,或在購買細胞株時咨詢。

2. 根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選1640;進行細胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實驗,可選擇IMDM。

3. 用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據(jù)實驗結(jié)果選擇*佳培養(yǎng)基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。

4.ATCC(American Type Culture Collection)收集了絕大多數(shù)細胞的詳細資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cells and hybridomas鏈接,輸入細胞名稱就可以搜索ATCC的細胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細胞的詳細描述,包括細胞的來源,培養(yǎng)和凍存條件,以及相關(guān)文獻等資料。

五、新配制的液體培養(yǎng)基能保存多久?

我們建議將新配制的培養(yǎng)基放置于4℃,避光保存盡量在一周內(nèi)使用完畢。培養(yǎng)基越新鮮越好。

 

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